Électrophysiologie cellulaire

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Ce document présente les compartiments liquidiens, les protéines de transport et le modèle électrique des membranes biologiques, ainsi que la mesure du champ électrique généré par les cellules.

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Question
Qu'est-ce que l'électrophysiologie?
Answer
L'étude des propriétés électriques des cellules vivantes et de la production de courants électriques par certains organismes.
Question
Qu'est-ce que le potentiel de membrane (Vm)?
Answer
La différence de potentiel électrique existant entre les faces interne et externe de la membrane d'une cellule.
Question
De quoi sont composées les membranes plasmiques?
Answer
D'une bicouche de lipides (phospholipides, glycolipides) qui sert de solvant pour des protéines transmembranaires.
Question
Comment les petites molécules apolaires (O₂, N₂) traversent-elles la membrane?
Answer
Elles diffusent rapidement à travers la membrane sans aide, en suivant leur gradient de concentration.
Question
Pourquoi la présence de transporteurs est-elle nécessaire?
Answer
Pour permettre aux petites molécules polaires, chargées, et aux ions de traverser la membrane qui leur est imperméable.
Question
Définissez un transporteur de type uniport.
Answer
Une protéine qui permet le passage d'un seul composé dans une seule direction à travers la membrane.
Question
Définissez un transporteur de type antiport.
Answer
Une protéine qui transporte au moins deux composés en sens opposés à travers la membrane.
Question
Définissez un transporteur de type symport.
Answer
Une protéine qui transporte au moins deux composés dans le même sens et en même temps à travers la membrane.
Question
Quelle est la principale caractéristique du transport passif?
Answer
Il suit le gradient de concentration (ou électrochimique) sans nécessiter d'apport d'énergie. Il n'est pas saturable.
Question
Quelle est la principale caractéristique du transport actif?
Answer
Il transporte un composé contre son gradient de concentration, ce qui nécessite un apport d'énergie. Il est saturable.
Question
D'où provient l'énergie du transport actif primaire?
Answer
L'énergie est fournie directement par l'hydrolyse de l'ATP.
Question
Quel est le rôle de la pompe ATPase Na⁺/K⁺?
Answer
Elle maintient les gradients ioniques en expulsant 3 Na⁺ et en important 2 K⁺. C'est un antiport électrogène.
Question
Quel est le rôle de l'ATPase Ca²⁺?
Answer
Maintenir une concentration basse de Ca²⁺ dans le cytosol en le pompant dans le réticulum endoplasmique. C'est un uniport.
Question
D'où provient l'énergie du transport actif secondaire?
Answer
De la décharge du gradient chimique d'un autre composé, comme le Na⁺ pour la pompe à glucose.
Question
Comment fonctionne la diffusion facilitée?
Answer
Une protéine interagit avec un composé pour faciliter son passage selon son gradient. Ce système est saturable.
Question
Par convention, quel signe a un courant de cations entrant dans une cellule?
Answer
Un courant de cations (Na⁺, K⁺, Ca²⁺) entrant dans une cellule est considéré comme un courant négatif.
Question
Comment est défini le potentiel transmembranaire (Em)?
Answer
Par la relation Em = Vint - Vext, où le potentiel externe (Vext) est la référence (0 mV).
Question
Que signifie qu'une cellule au repos est polarisée?
Answer
Elle a un excès de charges négatives à l'intérieur, rendant son potentiel de membrane Em négatif.
Question
Quand une cellule est-elle dite dépolarisée?
Answer
Lorsque son potentiel de membrane Em devient plus positif (ou moins négatif) que son potentiel de repos.
Question
Citez des examens mesurant l'activité électrique de populations cellulaires.
Answer
L'électrocardiogramme (ECG) pour le cœur, l'électromyogramme (EMG) pour les muscles et l'électroencéphalogramme (EEG) pour le cerveau.

INTRODUCTION

L'électrophysiologie est l'étude des propriétés électriquesdes cellules vivantes et des courants électriques qu'elles génèrent. Presque toutes les cellules vivantesmaintiennent une différence de potentiel () entre l'intérieur et l'extérieur de leur membrane cellulaire.

I- COMPARTIMENTS LIQUIDIENS

Les êtres vivants sont constitués de milieux liquides séparés par des membranes de perméabilité variable. Les membranes plasmiques sont des bicouches de phospholipides et de glycolipides agissant comme une barrière de perméabilité et servant de solvant pour les protéines transmembranaires. Elles sont caractérisées par une composition protéique et lipidique très asymétrique, tout comme lesmilieux intra- et extracellulaires.

1) Perméabilité des membranes

La perméabilité des membranes varie en fonction des molécules :

  • Les petites molécules apolaires (ex.O2, N2) diffusent rapidement.

  • Les petites molécules polaires non chargées (ex. CO2, H2O, urée) diffusent plus lentement.

  • Les grosses molécules polaires et chargées (ex. glucides) ne diffusent pratiquement pas.

  • Les grosses molécules et les ions ne diffusent pas directement.

Des transporteurs sont donc nécessaires pour le passage des petites molécules et des ions non perméants. Les macromolécules sont transportées via l'exocytose et l'endocytose.

II- PROTÉINES DE TRASPORT

De nombreuses protéines de transport facilitent le passage des composés à travers les membranes. Elles fonctionnent de différentes manières :

  • Uniport : Transport d'un seul composé dans une seule direction.

  • Antiport :Transport de deux ou plusieurs composés dans des directions opposées.

  • Symport : Transport de deux ou plusieurs composés dans la même direction.

Fig 1: Différents types de transporteurs.
Ces transporteurs sont classés entrois groupes :

1) Transport passif

Les composés traversent la membrane en suivant leur gradient de concentration (pour les composés non chargés) ou leur gradient électrochimique (pour les composés chargés), via la diffusion simple. La protéine ne sature pas et la seule limitation est la taille descomposés.

2) Transport actif

Le transport actif déplace les composés contre leur gradient de concentration, nécessitant un apport d'énergie. Il y a interaction entre la protéine de transport et le composé, et le système est saturable.

  • Transport actif primaire : L'énergieest fournie par l'hydrolyse de l'ATP.

    Exemples :

    1. ATPase Na+ /K+ : Un antiport qui fait sortir 3 et entrer 2 par molécule d'ATP hydrolysée.Ce transport est **électrogène** car le bilan des charges n'est pas nul, et son courant est mesurable. Son rôle est de maintenir les gradients ioniques de et de .

    2. ATPase Ca2+ : Un uniport électrogène quitransporte 2 par ATP hydrolysé, maintenant la concentration cytosolique de basse en le transportant vers le réticulum endoplasmique.

    3. ATPase H+ : Un uniport électrogène responsable de l'acidification des lysosomes et de l'estomac.

  • Transport actif secondaire : L'énergie est fournie par la décharge du gradient chimique d'un autre composé.

    Exemple :

    • Pompe à glucose : Un symport électrogène dansles cellules intestinales, permettant le passage du glucose grâce au gradient de .

3) Diffusion facilitée

Les composés traversent la membrane en suivant leur gradient de concentration (diffusion simple), mais la protéine améliore leur passage par interaction, rendant le système saturable.

Exemples :

  1. Gramicidine A : Transport de cations monovalents en symport.

  2. Canaux ioniques : Une grande diversité de transporteurs qui permettent le passage des ions à travers la membrane grâce à un pore hydrophile.

Tableau 2: Coefficient de diffusion de quelques ions à .

Ion

1,33

1,96

2,07

2,06

1,19

0,87

0,71

0,79

0,85

2,03

(Hille, 1992)

III- MODÈLE ÉLECTRIQUE DES MEMBRANES BIOLOGIQUES

Les principes de l'électricité appliqués aux électrons sont également applicables aux ionstraversant les membranes biologiques via les canaux ioniques.

  • Le courant ionique ( ou ), exprimé en , ou , représente le "débit" des ions. Par convention, l'entrée de cations (, , ) est un courant négatif, tandis que leur sortie est un courant positif (l'inverse pour les anions ).

  • Le potentiel électrique () représente la quantité de charges en un point. Le potentiel du milieu externe () est la référence, donc la différence de potentiel transmembranaire (, exprimé en ) est donnée par :

    est le potentiel du milieu interne dela cellule.

Une cellule au repos est polarisée, avec un excès de charges négatives à l'intérieur, rendant négatif.

  • Si le potentiel devient plus négatif, la cellule est hyperpolarisée.

  • Si le potentiel devient plus positif, la cellule est dépolarisée.

La résistance membranaire ( ou ), exprimée en ou , s'oppose au passage des ions.La résistance membranaire spécifique (), en , est la résistance par unité de surface de membrane. Inversement, la conductance membranaire ( ou ), en , ou , facilite le passage des ions.

Tableau 3: Exemple de concentrations en ions (en mM) dans les milieux interne et externe et potentiels d'équilibre correspondants.

Interne

Externe

14

140

160

3

1

14

150

Nota: pour les ions , le rapport des concentrations est inversé.

CONCLUSION

La maîtrise de ces principes électrophysiologiques permet de mesurerle champ électrique généré par de grandes populations de cellules synchronisées. Cela inclut le cœur (électrocardiogramme : ECG), les muscles (électromyogramme : EMG) ou le cerveau (électroencéphalogramme : EEG), au moyen d'électrodes de surface appliquées surla peau des patients.

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