Biologie de la reproduction : Spermiologie diagnostique

Spermiologie Diagnostique : Actes et Techniques

La spermiologie diagnostique est une branche essentielle de la biologie de la reproduction, visant à évaluer la qualité du sperme pour diagnostiquer l'infertilité masculine ou orienter vers les techniques d'assistance médicale à la procréation (AMP). Elle est encadrée par les normes de l'OMS 2021.

Introduction & Phase Pré-analytique

Les indications cliniques incluent le bilan d'infertilité du couple, l'évaluation avant AMP, et le suivi de contraception. Les conditions de recueil sont cruciales pour la fiabilité des résultats :

• Abstinence sexuelle de 2 à 7 jours (idéalement 3 à 5 jours).
• Recueil par masturbation au laboratoire dans un flacon stérile.
• Asepsie rigoureuse (miction préalable, lavage des mains et du gland).
• Analyse dans l'heure suivant le recueil, maintenu à 37°C.
• Toute perte de la première fraction de l'éjaculat doit être signalée, car elle est la plus riche en spermatozoïdes.

La liquéfaction est la première étape obligatoire, transformant le sperme coagulé en liquide en 15 à 60 minutes à 37°C. Une liquéfaction incomplète doit être notée et traitée (ex: bromélaïne).

Le Spermogramme : Paramètres Macroscopiques et Microscopiques

Le spermogramme évalue plusieurs paramètres du sperme selon les normes de l'OMS 2021 (6e édition).

Paramètres Macroscopiques

• Volume: Norme ≥ 1,4 mL. Un volume inférieur est une hypospermie.
• pH: Norme ≥ 7,2. Un pH acide peut indiquer une obstruction des canaux éjaculateurs.
• Aspect & Couleur: Normalement opalescent grisâtre. Jaune peut signaler une infection ou une abstinence prolongée.
• Viscosité: Norme Filament ≤ 2 cm. Une hyperviscosité peut altérer la mobilité.

Numération des Spermatozoïdes

La numération est souvent réalisée avec une cellule de Neubauer après dilution et immobilisation des spermatozoïdes. Des alternatives comme la cellule de Makler ou les analyseurs automatisés (CASA) existent. Un double comptage est toujours effectué pour garantir la précision.

• Concentration: Norme ≥ 16 millions/mL ().
• Nombre total: Norme ≥ 39 millions ().
• Une concentration inférieure est une oligozoospermie (modérée si 5-16 M/mL, sévère si < 5 M/mL).
• L'azoospermie est l'absence de spermatozoïdes, et la cryptozoospermie leur présence rare après recherche approfondie.

Mobilité des Spermatozoïdes

La mobilité est classée en quatre catégories :

• a Progressive Rapide (rectiligne ≥ 25 µm/s).
• b Progressive Lente (non rectiligne).
• c Non Progressive (mouvements sur place).
• d Immobiles (absence totale de mouvement).

Norme OMS 2021 : (a+b) ≥ 30% ou (a+b+c) ≥ 42%. Une mobilité réduite est une asthénozoospermie.

Vitalité et Morphologie

• La vitalité est évaluée si la mobilité totale < 54%, par le Test de Gonflement Hypo-Osmostique (HOS) (queue enroulée pour les vivants) ou la Coloration à l'Éosine-Nigrosine (tête colorée pour les morts). Norme OMS 2021 : ≥ 54% de spermatozoïdes vivants. Moins de 54% de vivants indique une nécrozoospermie.
• La morphologie est évaluée selon les critères stricts de Kruger. Norme OMS 2021 : ≥ 4% de formes typiques. Une proportion inférieure est une tératozoospermie. Les anomalies peuvent concerner la tête (macrocéphalie, globozoospermie), la pièce intermédiaire ou le flagelle (MMAF).

Test de Migration-Survie (TMS)

Le TMS est crucial pour sélectionner les spermatozoïdes les plus mobiles et typiques pour l'AMP. Il vise à reproduire le passage du tractus génital féminin.

• Migration ascendante ("swim-up"): Méthode simple mais à faible rendement. Le sperme est centrifugé, le culot est recouvert de milieu de culture, et les spermatozoïdes les plus mobiles migrent vers le haut.
• Gradient de densité: Méthode de référence pour tous les spermes. Le sperme est centrifugé sur des couches de densité différente (ex: 40%/80%), permettant de récupérer les spermatozoïdes de meilleure qualité au culot.

L'interprétation des résultats du TMS inclut la concentration, la mobilité progressive (idéalement ≥ 70% post-TMS), la survie à 4h/24h, et la morphologie. Le nombre de spermatozoïdes mobiles progressifs totaux (NSMPT) oriente vers la technique d'AMP appropriée :

• IIU (Insémination Intra-Utérine): NSMPT ≥ 1 million ().
• FIV classique: NSMPT ≥ 0,5 million ().
• ICSI (Injection Intra-Cytoplasmique de Spermatozoïde): NSMPT < 0,5 million () ou 0% de formes typiques.

Examens Complémentaires

• Leucospermie et Bactériologie séminale: La leucospermie est définie par des leucocytes > . Elle peut indiquer un stress oxydatif altérant la mobilité et l'ADN. Une spermoculture est nécessaire pour confirmer une infection bactérienne. La recherche de Chlamydia trachomatis ou Mycoplasma genitalium par PCR est aussi importante.
• Fragmentation de l'ADN spermatique (DFI): L'Indice de Fragmentation de l'ADN mesure les cassures dans l'ADN spermatique. Un DFI > 25% est défavorable et peut nécessiter des antioxydants ou une ICSI. Des techniques comme TUNEL, SCSA ou Comet test sont utilisées. Cet examen est recommandé en cas d'infertilité inexpliquée, d'échecs répétés d'AMP ou de fausses couches.
• Anticorps anti-spermatozoïdes (MAR test): Détecte la présence d'anticorps à la surface des spermatozoïdes, pouvant affecter la mobilité ou la fécondation. Un seuil ≥ 50% est significatif.
• Analyse de l'ultrastructure: La microscopie électronique (MET) est indiquée pour les asthénozoospermies totales, pouvant révéler des anomalies comme la Dyskinésie Ciliaire Primitive (DCP) ou le Syndrome de Kartagener.

Terminologie & Compte-rendu

Le compte-rendu doit être exhaustif, incluant la date/heure du recueil, le délai d'abstinence, les résultats de tous les paramètres, les techniques utilisées et les référentiels. La terminologie standardisée de l'OMS est utilisée :

• Normozoospermie: Tous les paramètres normaux.
• Oligozoospermie: Concentration ou nombre total réduit.
• Asthénozoospermie: Mobilité réduite.
• Tératozoospermie: Proportion de formes typiques réduite.
• Nécrozoospermie: Vitalité réduite.
• Oligoasthénotératozoospermie (OAT): Anomalie des trois paramètres principaux, avec un pronostic fertilisant sévère.

En cas de non-conformité de l'échantillon (ex: recueil incomplet, délai dépassé, liquéfaction anormale), l'analyse doit être réalisée et les réserves clairement mentionnées sur le compte-rendu, avec la proposition d'un nouveau recueil.