Prélèvement sanguin: règles et bonnes pratiques

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Cette note fournit un guide essentiel sur les règles, les dispositifs et les bonnes pratiques pour les prélèvements sanguins, incluant les obligations légales, la manipulation des échantillons et la gestion des déchets, afin de garantir la fiabilité des examens.

Notions Importantes au Prélèvement Sanguin pour Examen

Ils'agit d'un guide récapitulatif des points cruciaux pour toutexamen lié aux prélèvements sanguins, incluant les obligations légales, les composants du sang, les dispositifs de prélèvement, les types de tubes et lescritères d'acceptation.

I. Obligations Légales (Un cadre réglementaire strict)

  • Code de la Santé PubliqueArticle L4352-1 : Le technicien de laboratoire médical participe à la réalisation technique d'un examen, sous la responsabilité d'un biologiste médical. Il réalise des prélèvements sousdes conditions spécifiques.

  • Code de la Santé Publique Article R4352-13 : Les prélèvements de sang veineux ou capillaire (lobule, doigts, pli du coude, dos de la main, malléole) peuvent être effectués par des techniciens de laboratoire médical qualifiés (titulaires d'un certificat de capacité pour les prélèvements sanguins), sous la responsabilité d'un biologiste médical.

  • Norme ISO 15189 version 2022 :

    • 7.2.3 Demandes d'examens : Chaque demande est un contrat. Elle doit assurer la traçabilité patient/demande/échantillon, identifier le demandeur, préciser les examens et fournir des renseignements cliniques.

    • Demandes orales : une procédure doit être en place pour leur gestion, avec une confirmation écrite requise.

    • 7.2.4 Prélèvement et manipulation deséchantillons primaires :

      • Des procédures doivent être disponibles pour le prélèvement et la manipulation. Tout écart doit être enregistré et évalué.

      • Informations pré-prélèvement : incluent la préparation du patient(à jeun, médicaments), la nature et quantité de l'échantillon, le moment du prélèvement, l'étiquetage (identification sans équivoque, site, nature), et les critères d'acceptation/rejet.

      • Consentement despatients : Le consentement éclairé est obligatoire. Il peut être implicite (ponction veineuse) ou nécessiter une explication détaillée et un enregistrement pour des procédures plus invasives. En cas d'urgence, le consentement peut être différé si c'est dans l'intérêt du patient.

      • Instructions pour les activités de prélèvement : Vérification de l'identité du patient, respect des exigences préanalytiques, prélèvement correct, étiquetage systématique, enregistrement de l'identité du préleveur, de la date et de l'heure, instructionsde stockage et d'élimination sécurisée.

    • 7.2.5 Transport des échantillons : Instructions pour un transport sûr et rapide (conditionnement, délai, température, intégrité). En cas de compromission, informer et prendre des mesures correctives.

II. Les Composants du Sang

Le sang, qu'il soit in vivo ou recueilli sur anticoagulant, est un liquide complexe.

  • Le plasma ( du volume sanguin) est composéd'eau (), sels, lipides, hormones, et riche en protéines (albumine, immunoglobulines, facteurs de coagulation, fibrinogène).

  • Le plasma assure le transport des cellules et nutriments, la régulation hydrique et minérale, l'irrigationtissulaire, la défense immunitaire et la coagulation.

III. Les Différences entre Sang Total, Plasma et Sérum

Sang total sans gel séparateur

Plasma

Sérum

Obtenu avec un anticoagulant. Utilisé pour l'hématologie, les dosages biochimiques érythrocytaires, les identifications microbiologiques.

Obtenu après prélèvement sur anticoagulant et centrifugation du sang total. Le plasma est séparé du culot globulaire.

Obtenu après prélèvement sans anticoagulant, après coagulation et centrifugation. Le sérum est le plasma dont le fibrinogène a été consommé. (Sérum = plasma - fibrinogène).

L'aspect du plasma et du sérum (hémolysé, ictérique, lactescent) est crucial après centrifugation pour la qualité de l'analyse.
Hémolysé: libération d'hémoglobine des globules rouges (rougeâtre).
Ictérique: augmentation de bilirubine (jaunâtre).
Lactescent: présence d'hypertriglycéridémie (trouble, laiteux).

IV. Les Dispositifs de Prélèvements Veineux ou Capillaire

A. Généralités (Stérilité et usage unique)

  • Tout matériel est à usage unique stérile et marqué CE.

  • Avantages:

    • Patient: pas de risque de contamination microbiologique ou d'interférence.

    • Préleveur: pas de risque d'Accident d'Exposition au Sang (AES).

  • Stérilité: lematériel doit être stérile et apyrogène. La stérilisation est la responsabilité du fabricant.

    • La stérilité est une probabilité (jamais nulle).

    • Procédés de stérilisation: Chimique (oxyde d'éthylène),Physique (chaleur, vapeur), Mixte (vapeur + formaldéhyde).

B. Types de Dispositifs

  • Aiguilles:

    • Caractéristiques normalisées (longueur, gauge, biseau à , inox).

    • Les diamètres externes sont identifiés par un code couleur (norme NF EN ISO 6009).

  • Protecteurs d'aiguilles: Visent à piéger l'aiguille pour prévenir les AES, confirmé par un "clic" sonore.

  • Unités de prélèvements (Microperfuseurs): Indiquées pour les prélèvements difficiles (veines petites, roulantes), utilisées en pédiatrie, gériatrie, oncologie et pour les hémocultures.

  • Lancettes: Réservées aux prélèvements capillaires (pulpe du doigt, talon chez les nouveau-nés).

  • Dispositifs pour le temps de saignement (TS) technique d'Ivy:Libèrent une lamelle métallique pour une incision standardisée.

  • Garrot: Posé au-dessus du pli du coude pour gonfler les veines.

C. L'Élimination des Déchets (DASRI : Déchets d'Activités de Soins à Risques Infectieux)

Éviter le circuit des ordures ménagères pour prévenir les AES.

  • Boîtes à aiguilles rigides: Pour déchets piquants, coupants,tranchants (aiguilles, lames, lancettes, verre).

  • Caissons en carton: Pour déchets mous (compresses, pansements, gants). Interdit pour les piquants/coupants/tranchants non conditionnés.

  • Fûts et jerricans en plastique: Pour tous types de DASRI (mous et piquants/coupants/tranchants conditionnés).

Délai d'élimination des déchets :

  • : 3 mois

  • : 7 jours

  • : 72 heures

Traitement des DASRI par incinération dans des usines dédiées.

V. Les Tubes de Prélèvements Associés aux Examens et aux Préconisations

A. Les Tubes de Prélèvements (Code couleur et additifs essentiels)

Couleur

Contenu

Application - Intérêt

Neutre

Sans additif

Tube de purge ousecondaire.

Bleu

Citrate trisodique 9NC (1V pour 9V)

Plasma citraté, sang total. Pour coagulation(TP, TCA, Fibrinogène). Complexe le calcium. Remplir .

Bleu clair

CTAD (Citrate, Théophylline, Adénosine, Dipyridamole)

Plasma citraté. Pour mesures antiXa et TCA sous HNF. Optimise le délai pré-analytique à 6h. Conserver à l'abri de la lumière.

Noir

Citrate trisodique 4 NC (1V pour 4V)

Plasma citraté, sang total. Pour vitesse de sédimentation. Complexe le calcium.

Rouge/Jaune (avec ou sans gel)

Sec avec ou sans anticoagulant (micro-particules de silice)

Pour sérum. Activateurs de coagulation (silice, thrombine) réduisent le délai decentrifugation. Pour sérologies, biochimie, enzymologie, immunologie, hormonologie.

Vert (avec ou sans gel)

Héparine de lithium

Plasma hépariné, sang total.Pour biochimie, oligoéléments. Potentialise l'antithrombine III, faible pouvoir chélateur du calcium, n'altère pas la morphologie cellulaire.

Clair (Barricor)

Héparinede lithium (séparateur mécanique)

Plasma hépariné de haute qualité. Pour biochimie, notamment potassium.

Violet

EDTA(Éthylène Diamine TétraAcétique)

Sang total ou plasma. Anticoagulant anticalcique (neutralise calcium ionisé), car chélateur puissant. Pour numérations, groupes sanguins, HBA1c.

Gris

Fluorure de sodium et oxalate de potassium

Plasma fluoré. Le fluorure de sodium est un inhibiteur de la glycolyse. Pour dosages de glucoseet lactates.

Marron

EDTA + Aprotinine

Plasma. L'aprotinine inhibe enzymes protéolytiques. Pour dosages d'hormones peptidiques (ACTH), marqueurstumoraux, contrôle thrombolytiques.

Streck (DPNI)

Tube Streck (milieu stabilisateur)

Sang total. Pour dépistage des trisomies 13, 18, 21 (ADN fœtal circulant).

Kit Quantiferon

Tubes spécifiques (gris, vert, jaune, violet)

Plasma et sérum. Pour diagnostic tuberculose latente.

B. Avantages et Inconvénients des Anticoagulants

Matériel

Avantage(s)

Inconvénient(s)

Gels séparateurs

Séparation efficace, sécurité pour le technicien, volume optimisé.

Colmatage possible des tubulures, coût élevé.

EDTA

Très soluble, dilue peu lesang, altère peu la morphologie cellulaire.

Complexe tous les cations divalents, entraîne l'agrégation des thrombocytes.

Citrate trisodique

Complexe lecalcium sans troubler le plasma, altère moins l'activité des facteurs de coagulation.

Dilue le sang.

Oxalates

Stable.

Trouble le plasma, altère lesthrombocytes et certains facteurs de coagulation, modifie l'équilibre électrolytique et la morphologie cellulaire.

Héparinates

Ne dilue pas le sang, augmente la résistance des érythrocytes à l'hémolyse.

Bloque irréversiblement la coagulation, modifie les thrombocytes et la coloration de MGG.

C. Volume de Remplissage des Tubes

Crucial pour la validité desrésultats, surtout pour les tubes à anticoagulant.

D. L'Ordre de Prélèvement des Différents Tubes

Avec une aiguille (ponction franche), l'ordre de prélèvement est essentiel pour éviter les contaminations d'additifs.

  • 1. Tubes sans additif (tube neutre ou de purge).

  • 2. Tubes de coagulation (citrate trisodique).

  • 3. Tubes avec ou sans gel séparateur (sérum, héparinede lithium).

  • 4. Tubes EDTA.

  • 5. Tubes Glucose (fluorure de sodium).

  • 6. Autres tubes (ACD, VS, Aprotinine, tube Thrombine, toujours en dernier).

E. Nombre de Retournements des Tubes aprèsPrélèvement

  • Citrate/CTAD: 3-4 retournements lents.

  • SST II/CAT: 5-6 retournements lents.

  • Autres (EDTA, Héparine, Fluorure): 8-10retournements lents.

F. Critères d'Acceptation d'un Échantillon (La checklist finale)

Un échantillon doit être accepté seulement s'il respecte les points suivants :

  • Identifié:Genre/Sexe, Nom de naissance, Nom d'usage, Prénom, Date de naissance.

  • Adéquation du récipient: Correspondance tube/examens demandés.

  • Respect des volumes de remplissage.

  • Respect des conditions pré-analytiques (ex: à jeun).

  • Récipient non périmé.


Rappel important pour l'examen:Maîtriser les bases légales, comprendre le rôle des différents tubes et anticoagulants, et appliquer scrupuleusement les règlesde prélèvement et d'élimination des déchets sont les clés de la réussite.

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